免费三级现频在线观看视频,成年人黄色视频在线播放,三级片点击进入在线影院,色色无码午夜,免费无吗色色,成人综合色情偷拍AV综合

中文標題：癌癥易感性候選物9的沉默抑制胃癌并逆轉化學抗性

發(fā)表期刊：Oncotarget

影響因子：5.168

發(fā)表時間：2017年1月

合作單位：中國醫(yī)科大學基礎醫(yī)學院神經生物學教研室

運用技術：載體構建（由輝駿生物提供技術支持）

● 研究背景

胃癌(GC)作為最常見的實體惡性腫瘤之一，由于其局部晚期轉移和復發(fā)頻率較高，預后較差。化療耐藥可能是化療后復發(fā)的原因之一，因此了解化療耐藥的潛在機制，尋找新的治療靶點，進一步改善胃癌的預后是至關重要的。長非編碼RNA(LncRNA)是一種不能翻譯成蛋白質的內源性RNA，它可以作為許多基因的轉錄調節(jié)因子，參與癌癥增殖、侵襲和化療耐藥的關鍵步驟。癌易感候選物9(CASC9)基因位于8q21.11，編碼一個lncRNA。該基因在食管鱗狀細胞癌(ESCC)中被證實可調節(jié)癌細胞的遷移和侵襲。通過基因芯片檢測，研究者發(fā)現(xiàn)CASC9在胃癌組織中的表達是正常胃組織的近8倍，這一觀察結果促使研究者進一步研究其在細胞增殖、侵襲和化療耐藥中的作用。

● 研究結果

1.     CASC9在胃癌組織和細胞系中表達上調

首先，研究者對5例胃癌(GC)和配對正常胃組織(NST)中的CASC9的表達進行了微陣列分析。結果顯示，GC組中CASC9的表達幾乎是NST組中的8倍(圖1A)。QRT-PCR進一步證實了這一結果，與對照組NST相比，CASC9在89例胃癌組織中的表達顯著增高(圖1B)。CASC9在胃癌細胞系BGC823和SGC7901細胞中的表達明顯高于正常胃上皮細胞(圖1B)。研究者還進一步分析了CASC9表達與胃癌臨床病理特征的關系。結果顯示，CASC9的表達水平與腫瘤大小、浸潤深度和淋巴結轉移數(shù)有關，在Borrmann3型、4型、低分化、干擾素γ浸潤型的腫瘤中，CASC9的表達水平明顯高于Borrman1型、2型、高、中分化、干擾素α/β浸潤型的腫瘤，表明CASC9可能在胃癌的發(fā)生、發(fā)展和轉移中起一定作用。

圖1

2. CASC9在胃癌耐藥細胞系中表達上調

紫杉醇對BGC823/DR和SGC7901/DR細胞的IC50值分別為183.33±0.4 1μg/L和146.54±0.5 7μg/L，明顯高于BGC82 3和SGC790 1細胞。阿霉素對BGC823/DR和SGC7901/DR細胞的IC50值分別為7.2 6±0.2 1μg/mL和5.41±0.14μg/mL，明顯高于BGC823和SGC7901細胞。CASC9在耐藥的BGC823/DR和SGC7901/DR細胞中的表達明顯增高(圖1B)，這表明CASC9的過度表達與胃癌的化療耐藥有關。

3. CASC9基因敲除抑制耐藥胃癌細胞的生長和侵襲

為了評估CASC9是否會影響耐藥GC細胞的生長和侵襲，研究者建立了穩(wěn)定表達CASC9沉默載體的細胞，并通過qRT-PCR確認敲低情況（圖2A）。如圖2B和2C所示，CASC9敲低抑制BGC823/DR和SGC7901/DR細胞的細胞生長。流式細胞分析結果顯示，CASC9敲低與細胞凋亡顯著增加相關（圖2D）。細胞侵襲實驗結果也表明，CASC9敲低也阻礙了BGC823/DR和SGC7901/DR細胞中的細胞侵襲（圖2E，F(xiàn)）。

圖2

4. CASC9基因敲除抑制耐藥GC細胞的化療耐藥性

在BGC82 3/DR和SGC790 1/DR細胞中，CASC9基因敲除使其對紫杉醇恢復敏感：IC50值分別從183.33±0.41μg/L和146.54±0.57μg/L降至72.31±0.28μg/L和58.62±0.32μg/L（圖3A）。類似地，CASC9基因敲除也使細胞恢復對阿霉素的敏感性，IC50分別從7.26±0.21μg/mL和5.41±0.14μg/mL降至4.17±0.19μg/mL和2.28±0.16μg/mL（圖3B）。

圖3

5. CASC9基因敲除與耐藥GC細胞MDR1下調相關

微陣列分析的初步結果顯示，CASC9和MDR1之間存在正相關。研究者使用Western blot方法檢測了CASC9基因敲除前后BGC823/DR和SGC7901/DR細胞中MDR1的表達水平。結果表明，CASC9基因敲除與MDR1表達降低有關(圖3C)。