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服務(wù)介紹

化合物 pull down 實(shí)驗(yàn)原理


無(wú)論藥物研發(fā)還是基礎(chǔ)科研,檢測(cè)化合物(如小分子藥物)與蛋白質(zhì)之間的相互作用都是一類重要的實(shí)驗(yàn)。化合物pull down是體外研究化合物與蛋白質(zhì)相互作用的方法。利用生物素與鏈霉親和素之間的高親和力,可以從各種類型目標(biāo)樣本中調(diào)取目標(biāo)化合物的結(jié)合蛋白。

 

生物素標(biāo)記的化合物先與鏈霉親和素磁珠孵育,之后與樣本蛋白液孵育,目標(biāo)化合物及其結(jié)合蛋白便一起吸附在磁珠上。洗滌去掉未結(jié)合的蛋白后,用洗脫液將結(jié)合蛋白從磁珠上洗脫下來(lái),之后可以采用Western Blot技術(shù)檢測(cè)特定的結(jié)合蛋白,還可以采用質(zhì)譜方法鑒定與目標(biāo)化合物結(jié)合的未知蛋白。




化合物pull-down實(shí)驗(yàn)-輝駿服務(wù)優(yōu)勢(shì)



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輝駿生物10年科研服務(wù)經(jīng)驗(yàn),專業(yè)提供分子互作實(shí)驗(yàn)服務(wù),包括蛋白與蛋白、蛋白與化合物、蛋白與RNA、RNA與RNA的相互作用技術(shù);經(jīng)驗(yàn)豐富,實(shí)驗(yàn)結(jié)果穩(wěn)定、可靠。
?我公司自有質(zhì)譜實(shí)驗(yàn)平臺(tái),對(duì)微量互作蛋白的質(zhì)譜鑒定有充足把控力,對(duì)后續(xù)功能分析有獨(dú)到見(jiàn)解。
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化合物pulldown實(shí)驗(yàn)技術(shù)原理


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化合物Pull down技術(shù)實(shí)驗(yàn)—輝駿服務(wù)內(nèi)容


服務(wù)項(xiàng)目服務(wù)內(nèi)容結(jié)果交付實(shí)驗(yàn)周期客戶提價(jià)格

化合物 pull down WB

(驗(yàn)證型)

Western blot檢測(cè)樣本中的待測(cè)蛋白Western blot檢測(cè)圖4-5周

實(shí)驗(yàn)樣本

生物素標(biāo)記的化合物和單生物素對(duì)照

待測(cè)蛋白抗體

實(shí)驗(yàn)信息表



點(diǎn)擊詢價(jià)



pull-down捕獲生物素標(biāo)記化合物及其結(jié)合蛋白

Western blot檢測(cè)圖

pulldown實(shí)驗(yàn)報(bào)告

化合物 pull down MS

(篩選型)

pulldown捕獲生物素標(biāo)記化合物及其結(jié)合蛋白

SDS-PAGE銀染檢測(cè)圖

pull-down實(shí)驗(yàn)報(bào)告

6-7周

實(shí)驗(yàn)樣本

生物素標(biāo)記的化合物和單生物素對(duì)照

實(shí)驗(yàn)信息表



點(diǎn)擊詢價(jià)



LC-MS/MS檢測(cè)及數(shù)據(jù)分析

質(zhì)譜檢索結(jié)果及報(bào)告

互作蛋白篩選表格

生信分析結(jié)果和報(bào)告




化合物pull-down實(shí)驗(yàn)服務(wù)外包—樣本要求


樣本類型
化合物pull down WB建議送樣量化合物pull down MS建議送樣量
動(dòng)物細(xì)胞
3*10e7個(gè)細(xì)胞/組(約3個(gè)10cm皿)5*10e7個(gè)細(xì)胞/組(約5個(gè)10cm皿)
動(dòng)物組織1g/組2g/組
植物葉片2g/組4g/組
植物根或果實(shí)4g/組8g/組
菌體50ul菌體沉淀/組100ul菌體沉淀/組

▲注意:以上均為每組樣本的送樣量,如果實(shí)驗(yàn)和對(duì)照組用的樣本一致,此樣本量*2。詳細(xì)送樣指南可聯(lián)系輝駿生物索取。

保存及運(yùn)輸:-80℃保存,干冰取樣/運(yùn)輸,至少在送樣前2天通知我司。




藥物Pull down技術(shù)服務(wù)結(jié)果示例


化合物pull-down.jpg

 藥物Pull down MS產(chǎn)物銀染圖 


RNA pulldown質(zhì)譜檢索表格

 藥物Pull down MS質(zhì)譜檢索表格(部分展示)


分析結(jié)果

 潛在結(jié)合蛋白的生物信息學(xué)分析結(jié)果(部分展示)




小分子Pull Down實(shí)驗(yàn)參考文獻(xiàn)


Chen X. et al: Celastrol induces ROS-mediated apoptosis via directly targeting peroxiredoxin-2 in gastric cancer cells. Theranostics. 2020.

使用相關(guān)技術(shù):RNA pull down MS、小分子pull down、化合物pull down、藥物pull down



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